利来国际推出的聚合酶链式反应（PCR）技术，作为一种在体外扩增特定DNA片段的方法，广泛应用于生物医学研究。其基本原理是通过模拟DNA的自然复制过程，利用DNA聚合酶来实现对特定DNA的快速扩增。

PCR反应原理

PCR的基本原理是基于三个循环步骤：DNA的变性、退火和延伸。每完成一个循环，DNA的数量就会翻倍，经过多轮循环即可获得大量目标DNA片段。

成功实施PCR所需条件

为了建立一个成熟且稳定的PCR反应体系，需要满足以下条件：

• 完整且纯净的模板（通过胶图和Nanodrop测值进行评估）
• 高特异性和高品质的引物（引物设计软件评分）
• 适宜的反应体系（根据模板的GC含量，考虑添加DMSO或甜菜碱，及镁离子的添加量）
• 合理的扩增反应程序（多次摸索引物Tm值附近的最佳退火温度）

PCR仪器的选择

与PCR仪的性能密切相关，若PCR仪具备温度梯度功能，可以通过设置不同的温度梯度来加速实验进程，快速确定退火温度。利来国际提供的柏恒梯度PCR仪（RePure系列）具备多种温度梯度功能，有效支持您的PCR实验。

常规梯度

在常规梯度模式下，用户可单向设置退火温度的低值和高值，温度在中间孔位渐进分布，但首尾孔位之间的温度不一定呈等差分布。

线性梯度

线性梯度功能允许用户设定一个中间温度和相邻孔位的温差，从而在各孔位间精准生成所需温度。此功能是国内品牌中利来国际唯一具备的，能够在一次实验中有效验证多个不同退火温度，缩短验证周期并提高实验效率。

二维梯度的优势

二维梯度PCR技术可同时设置纵向和横向的常规或线性梯度，形成一个在不同温度下同时进行变性和退火反应的阵列。其优势包括：

• 提高PCR反应的特异性，减少非特异性产物生成。
• 通过优化各分子靶点，提高PCR反应的产物纯度。
• 能够检测基因突变，通过设计适当引物进行PCR扩增和序列测定。
• 通过检测种群间的遗传多样性，挖掘突变位点。
• 简化操作，配置一个反应体系即可完成实验。
• 提高阳性检测的准确性，减少假阳性率。
• 缩短实验时间，迅速优化最佳反应温度。

独立温区的创新

柏恒梯度PCR仪还具有独立的6个温区，每个相邻温区可设定不超过5℃的温差。这一功能允许在不同温区内同时进行退火温度的摸索，显著提升实验的灵活性和准确性。

总之，利来国际的柏恒梯度PCR仪通过先进的温度控制和优化功能，能够极大提高PCR实验的准确性和效率，是生物医学领域研究不可或缺的工具。