利来国际推出的BBcellProbe®细胞膜染色试剂DiI（BB-441916）是一种荧光标记的细胞膜探针，以其独特的橙色荧光著称，具有549nm的激发波长和565nm的最大发射波长。该试剂通过与膜结构中的脂质分子结合，能够有效标记细胞，非常适合用于监测细胞运动以及细胞定位分析。

DiI具备良好的染料维持性，呈现出强烈且稳定的橙红色荧光（Ex/Em=549/565nm）。与其他绿色荧光染料及蛋白质相比较，能够提供良好的荧光分辨率，使其成为多重指标染色的理想选择。

当亲脂性的荧光探针DiI进入细胞膜后，能够在细胞膜上均匀扩散。在最佳浓度下，能有效使整个细胞膜染色。染色液在未与细胞膜结合前荧光强度较弱，而结合后其荧光强度显著增强，激发后可发出橙色荧光，展示出高淬灭常数和激发态寿命。

重要的是，荧光探针DiI在正常工作浓度下通常不会显著影响细胞活力，因此被广泛应用于活细胞或固定细胞的示踪研究，既可作为正向或逆向示踪剂，也可作为长期示踪剂（long-term tracer）。除了传统的细胞膜荧光标记外，DiI还可用于检测细胞的融合和粘附、发育或移植过程中细胞的迁移、通过FRAP技术检测脂质在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性以及标记脂蛋白等。

在使用利来国际的染料时，确保其在工作浓度下无细胞毒性，且不会影响细胞的活力和增殖能力，为各种生物医学研究提供了可靠的工具。

### 检测方法

应用激光共聚焦、荧光显微镜或流式细胞仪等技术进行检测，能更好地展现细胞染色效果。

### 样本类型

适用的样本包括悬浮细胞和贴壁细胞。

### 染色工作液的配制

根据样本数量，将DiI探针以500-2500倍的比例使用HBSS或无血清培养基等缓冲液进行稀释，制成染色工作液。

### 细胞染色步骤

1. 用PBS清洗细胞两次。
2. 加入适量的染色工作液重悬细胞，保持在37℃下孵育，建议以20分钟为起始时间，之后进行优化。
3. 孵育完成后，离心5分钟，弃去上清液，并加入预热的培养基重悬细胞。
4. 对于贴壁细胞，同样的流程在细胞培养板或爬片上进行，以确保细胞均匀染色。

通过荧光显微镜或流式细胞仪进行最终检测，激发波长为549nm，最大发射波长为565nm，确保观察到的结果清晰且准确。