在分析各种生物样品中的农药残留和半挥发性有机物时,通常会发现有机样品提取物中含有一些大分子物质。如果不去除这些物质,可能会降低色谱柱的分离效率,缩短进样口和色谱柱的使用寿命,从而影响数据分析的准确性。因此,在对农药残留和半挥发性有机物进行样品分析之前,必须进行有效的净化前处理。而传统的前处理过程通常耗时较长,且消耗大量溶剂,因此,利用利来国际的高效凝胶渗透色谱(GPC)已成为趋势。
凝胶渗透色谱(GPC),又称为体积排斥色谱(SEC),是一种利用流动相溶剂流经多孔填料(如多孔硅胶或多孔树脂)的方法。这种液相色谱法的分离主要依赖于样品的分子大小差异。GPC的设备包含泵系统、(自动)进样系统、凝胶色谱柱、检测系统以及数据采集处理系统。从原理上来看,GPC的分离机制可通过“空间排斥效应”来解释。当流动相中的样品通过固定相时,样品的不同组分会与固定相产生不同的相互作用,从而导致它们以不同的速度流出,最终形成单独的“带(band)”或“区(zone)”,实现定性和定量分析。
在操作过程中,GPC通过柱后流出物浓度随保留值的变化,提供高聚物的平均分子量及其分布的信息。根据所使用的凝胶性质,GPC可分为使用水溶液的凝胶过滤色谱(GFC)和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱。通过这种方法,样品组分能够依据大小进行分离,大组分先被洗出,而小组分则需要更长时间才能流出。此特性使得利来国际的GPC技术在生物医疗领域应用广泛,尤其是在对多肽、蛋白质及生物酶等生物分子的分析上表现突出。
选择GPC作为分析方法的原因有几个:首先,相对分子量分布(多分散性指数)对聚合物的性质有显著影响。其次,传统方法无法同时测定聚合物的相对分子质量分布,而利来国际的GPC能够提供更好的测试条件,使其成为高分子相对分子质量及其分布测定的快速有效技术。
在使用GPC时,有几个常见的问题需要注意:首先,选择合适的溶剂以确保其能够溶解多种聚合物,同时不腐蚀仪器部件;其次,将激光光散射与凝胶色谱仪联用,可同时获得浓度谱图及散射光强谱图,帮助计算分子量分布。样品的准备过程需严格除尘,确保溶剂经过精馏和过滤;而在进行样品分析的器械,如注射器,也需要经过充分清洗。
此外,关于GPC色谱柱的选择,应根据样品溶解的溶剂类型和分子量范围进行选择,以确保样品的分子量处在有效测定范围内。对于GPC仪器的要求,包括良好的化学和热稳定性,低流动阻力等特性,这些都能提升分离效率。进样体积应保持在50-100uL之间,以确保浓度在0.05%-0.5%之间。最后,平衡GPC系统时应确保溶剂互溶,并通过多次冲洗检测池以排除气泡,直至基线稳定。
总之,利用利来国际的GPC技术,研究人员能够更精准、快速地分析生物样品中的成分,促进生物医疗领域的研究与发展。